Kaedah mikroskopik Mikrobiologi

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. kaedah penyelidikan mikroskopik cara untuk meneroka pelbagai objek dengan menggunakan peralatan khas. Ia membolehkan kita untuk mempertimbangkan struktur bahan dan organisma, magnitud yang di luar batas resolusi mata manusia. Artikel ini memberikan analisis ringkas daripada kaedah mikroskopik.

gambaran Keseluruhan

используют в своей практике разные специалисты. Kaedah moden pemeriksaan mikroskopik menggunakan pakar-pakar yang berbeza dalam amalan mereka. Antaranya ialah virologi, sitologi, hematologi, morfologi, dan lain-lain. Kaedah utama untuk pemeriksaan mikroskopik yang dikenali untuk masa yang lama. Yang pertama adalah cara yang terang melihat objek. Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, secara aktif diperkenalkan ke dalam amalan, dan teknologi lain. . Oleh itu, populariti yang diperolehi fasa Sebaliknya, pendarkilau, gangguan, polarisasi, inframerah, ultraungu, kaedah stereoskopik penyelidikan. Kesemua mereka adalah berdasarkan kepada pelbagai ciri-ciri cahaya. . Di samping itu, digunakan secara meluas kaedah mikroskopi elektron. Kaedah-kaedah ini membolehkan objek paparan menggunakan aliran arah zarah bercas. Ia harus diperhatikan bahawa kaedah kajian yang digunakan bukan sahaja dalam biologi dan perubatan. в промышленности. Cara agak popular kajian mikroskopik logam dan aloi dalam industri. Ini membolehkan kajian untuk menilai tingkah laku sebatian menghasilkan teknologi untuk mengurangkan kebarangkalian patah dan peningkatan kekuatan.

cara cahaya: ciri-ciri

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. kaedah mikroskopik itu bagi mengkaji mikroorganisma dan kemudahan lain berdasarkan berbeza resolusi peralatan. Satu lagi faktor penting dalam hal ini adalah arah ciri-ciri rasuk objek itu sendiri. Yang terakhir ini, khususnya, boleh telus atau legap. Mengikut sifat-sifat objek, menukar sifat-sifat fizikal fluks cahaya - kecerahan dan warna kerana amplitud dan panjang gelombang, kapal terbang, fasa dan arah perambatan gelombang. . Mengenai penggunaan ciri-ciri ini dan membina kaedah mikroskopik berbeza.

kekhususan

Untuk mengkaji cara-cara objek cahaya, biasanya berwarna. Ini menjadikan ia mungkin untuk mengenal pasti dan menerangkan atau lain-lain hartanah. Ia adalah perlu bahawa tisu telah ditetapkan, kerana pewarna mendedahkan struktur tertentu semata-mata dalam sel-sel dibunuh. Dalam sel hidup memisahkan pewarna dalam bentuk vacuoles dalam sitoplasma. Dia tidak cat lebih struktur. Tetapi dengan objek sebenar dan boleh dikaji dengan menggunakan mikroskop cahaya. Untuk tujuan ini, cara yang penting dalam pembelajaran. Dalam kes seperti ini, condenser darkfield. Ia tertanam dalam mikroskop cahaya.

Mengkaji objek unpainted

Ia dijalankan oleh fasa-contrast mikroskop. Kaedah ini adalah berdasarkan pembelauan rasuk mengikut ciri-ciri objek. Semasa pendedahan yang menandakan perubahan dalam fasa dan panjang gelombang. Dalam kanta mikroskop adalah plat lut hadir. Hidup atau tetap, tetapi bukan objek dicat kerana ketelusan, hampir tidak berubah warna, dan amplitud rasuk melalui mereka, memprovokasi hanya anjakan fasa gelombang. Tetapi dalam kes ini, selepas melalui objek, fluks cahaya dipesongkan oleh plat. Akibatnya, antara rasuk, hilang melalui objek dan memasukkan ke dalam latar belakang terang, perbezaan panjang gelombang berlaku. Pada nilai tertentu kesan visual berlaku - objek yang gelap akan dapat dilihat dengan jelas pada latar belakang cahaya, atau sebaliknya (mengikut ciri-ciri plat fasa). Untuk mendapatkan perbezaan ini hendaklah sekurang-kurangnya 1/4 panjang gelombang.

Cara Anoptralny

Beliau adalah sejenis kaedah fasa-contrast. Cara Anoptralny melibatkan penggunaan lensa dengan plat khas, yang berubah hanya warna dan kecerahan cahaya ambien. Ini sangat memperluaskan kemungkinan mengkaji objek hidup unstained. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Applied fasa Sebaliknya kaedah mikroskop penyelidikan dalam bidang mikrobiologi, parasitologi dalam kajian sel tumbuhan dan haiwan, protozoa. Dalam kaedah hematologi yang digunakan untuk mengira dan menentukan pembezaan sel-sel darah dan sum-sum tulang.

teknik gangguan

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Kaedah penyelidikan mikroskopik umumnya menyelesaikan masalah yang sama seperti fasa kontras. Walau bagaimanapun, dalam kes kedua, pakar-pakar, hanya memerhatikan kontur objek. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Gangguan kaedah penyelidikan mikroskopik membolehkan kita untuk mengkaji sebahagian mereka, melaksanakan unsur-unsur penilaian kuantitatif. Ini mungkin disebabkan oleh pembelahan pancaran cahaya. Satu aliran melalui objek zarah, dan yang lain - oleh. Dalam kanta mata mikroskop mereka bertemu dan campur tangan. perbezaan fasa yang terhasil boleh ditentukan mengikut berat struktur sel yang berbeza. Apabila pengukuran berurutan adalah dengan yang telah ditetapkan indeks biasan boleh ditetapkan tisu tebal unfixed dan objek hidup, kandungan protein di dalamnya, kepekatan pepejal dan air, dan sebagainya. Selaras dengan pakar data yang diterima dapat secara tidak langsung menilai kebolehtelapan membran, aktiviti enzim, metabolisme sel.

polarisasi

Ia dijalankan dengan cara Nicol prisma atau polaroids filmy. Mereka diletakkan di antara spesimen dan sumber cahaya. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. kaedah mikroskopi polarisasi penyelidikan dalam bidang mikrobiologi membolehkan kita untuk mengkaji objek dengan ciri-ciri tak homogen. Dalam struktur isotropi kelajuan perambatan cahaya adalah bebas daripada pesawat yang dipilih. Dalam kadar sistem anisotropic berbeza mengikut cahaya yang berorientasikan sepanjang melintang atau paksi membujur objek. Jika nilai indeks biasan sepanjang struktur tersebut akan menjadi lebih besar daripada di sepanjang melintang, mewujudkan pembiasan double positif. Ini adalah lazim bagi kebanyakan objek biologi yang mendapati orientasi molekul yang ketat. Mereka semua akan anisotropic. Dalam kategori ini, khususnya, myofibrils, neurofibrils, silia dalam epitelium feniks mata, serat kolagen, dan lain-lain.

nilai polarisasi

Perbandingan sifat radiasi dan anisotropi indeks biasan objek membolehkan untuk menganggarkan struktur molekul organisasi. Cara polarisasi berfungsi sebagai salah satu kaedah analisis histologi digunakan dalam sitologi dan sebagainya. Bukan sahaja objek dicat boleh dikaji dalam kerajaan terang. Cara polarisasi membolehkan untuk memeriksa unstained dan unfixed - asli - persediaan seksyen tisu.

teknik pendarfluor

Mereka adalah berdasarkan kepada sifat-sifat objek tertentu memberi cahaya di bahagian biru-ungu spektrum atau UV sinar. Banyak bahan-bahan seperti protein, vitamin, enzim, dadah, dikurniakan dengan utama (en) luminescence. objek lain mula bersinar dengan menambah fluorochrome a - pewarna khas. Ini tambahan yang terpilih meresap atau diedarkan ke dalam struktur sel berasingan atau bahan kimia. Hartanah ini merupakan asas penggunaan mikroskop pendarfluor dengan histochemical dan kajian sitologi.

Bidang penggunaan

Menggunakan pakar-pakar imunisasi pendarfluor mengesan antigen virus dan tumpuan mereka diselaraskan dikenal pasti virus anti badan dan antigen, hormon, pelbagai produk metabolik dan sebagainya. Dalam hal ini, diagnosis herpes, beguk, hepatitis B, selesema dan jangkitan lain menggunakan kaedah pendarfluor penyelidikan bahan-bahan. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. kaedah imunisasi pendarfluor mikroskopik mengesan tumor malignan, menentukan kawasan iskemia jantung pada peringkat awal serangan jantung dan sebagainya.

Penggunaan ultraviolet

Ia adalah berdasarkan kepada keupayaan beberapa bahan-bahan dalam sel hidup atau mikroorganisma adalah tetap, tetapi uncolored telus di bawah fabrik cahaya yang boleh dilihat menyerap sinaran UV dari panjang gelombang tertentu. Ini adalah benar khususnya untuk sebatian tinggi-molekul. Ini termasuk protein, asid aromatik (methylalanine, tryptophan, tyrosine, dan lain-lain), asid nukleik dan asas purin piramidinovye dan sebagainya. mikroskop UV membolehkan untuk menentukan lokasi dan bilangan sebatian ini. Dalam kajian hidupan profesional boleh melihat perubahan dalam proses metabolik mereka.

tambahan

mikroskop inframerah digunakan dalam kajian ini adalah legap kepada cahaya dan sinar ultraviolet melalui penyerapan objek mengalir struktur yang panjang gelombang 750-1200 nm. Untuk menggunakan kaedah ini tidak ada keperluan untuk pra-mendedahkan ubat-ubatan untuk rawatan kimia. Biasanya, kaedah IR yang digunakan dalam bidang antropologi, zoologi dan sains lain industri. Bagi ubat-ubatan, kaedah ini digunakan terutamanya dalam oftalmologi dan Neuromorphology. Objek kajian dimensi dengan menggunakan mikroskop stereoskopik. reka bentuk perkakasan membolehkan untuk memantau mata kiri dan kanan pada sudut yang berbeza. objek legap disiasat pada pembesaran yang rendah (120 kali paling banyak). kaedah stereoskopik digunakan dalam pembedahan mikro, Pathomorphology dalam perubatan forensik.

mikroskop elektron

Ia digunakan untuk mengkaji struktur sel-sel dan tisu dalam tahap makromolekul dan subcellular. Mikroskop elektron membenarkan kami untuk membuat lompatan kualitatif dalam bidang penyelidikan. Kaedah ini digunakan secara meluas dalam biokimia, onkologi, virologi, morfologi, imunologi, genetik, dan bidang-bidang lain. memainkan peranan dalam meningkatkan resolusi yang disediakan dengan peralatan aliran kapasiti elektron yang melalui bidang vakum elektromagnet. kedua, seterusnya, mewujudkan kanta khas. Elektron dapat melalui struktur objek atau dilihat dari mereka dengan penyelewengan dari sudut yang berbeza. Hasilnya dipaparkan pada skrin pendarfluor peranti. Jika penghantaran mikroskop pandangan satah diperolehi apabila mengimbas masing-masing mengelilingi.

prasyarat

Perlu diingat bahawa sebelum lulus pemeriksaan mikroskopik elektronik, objek itu tertakluk kepada latihan khas. Khususnya, penggunaan penetapan fizikal atau kimia tisu dan organisma. bahan keratan biopsi dan, di samping itu, dikeringkan, tertanam dalam resin epoksi, potong kaca atau berlian pisau pada bahagian ultrathin. Kemudian kontras dan kajian mereka. Imbasan mikroskop mengkaji permukaan objek. Untuk melakukan ini, mereka disembur bahan khas dalam kebuk vakum.